Mutacje SLC25A32 i nietolerancja cwiczen na ryboflawiny

Wielokrotny niedobór dehydrogenacji acylo-koenzym A jest wrodzonym błędem metabolizmu z częstym zaangażowaniem mięśni. Niedobór ten wynika z defektów w genach flawoprotein przenoszących elektrony ETFA i ETFB1 lub w genie oksydoreduktazy flawoproteinowej U-fluorochinonu przenoszącego elektrony ETFDH.2 U pacjentów z tym niedoborem wszystkie mitochondrialne dehydrogenazy flawoproteinowe są defektywne specyficznym biochemicznym fenotypem dla wielu acylów. – niedobór odwodornienia koenzymu A. Jednak u kilku pacjentów z niedoborem podobnym do wielokrotnego niedoboru dehydrogenacji acylo-koenzymu A, nie wykryto mutacji w ETFA, ETFB lub ETFDH.3 Opowiadamy o 14-letniej dziewczynce, u której wystąpiła nawracająca nietolerancja wysiłkowa. Miała biochemiczne cechy wielokrotnego niedoboru dehydrogenacji acylo-koenzymu A, ale nie miała mutacji w ETFA, ETFB lub ETFDH. Doustna suplementacja ryboflawiną doprowadziła do dramatycznej poprawy klinicznych i biologicznych niepraw idłowości. Ryboflawina jest prekursorem dinukleotydu flawinoadeninowego (FAD), kofaktora dla flawoproteiny przenoszącej elektrony i oksydoreduktazy ubiquinonowej z transferowanej elektronowo flawoproteiny. Podejrzewaliśmy zatem defekt w biosyntezie lub transporcie FAD i badaliśmy geny zaangażowane w metabolizm ryboflawiny. Dwie heterozygotyczne mutacje, c.425G ? A (p.Trp142 *) i c.440G ? A (p.Arg147His), zidentyfikowano w rodzinie nośników substancji rozpuszczonych 25, element 32 (SLC25A32). SLC25A32 koduje mitochondrialny transporter FAD, wewnętrzny mitochondrialny nośnik błony, który importuje FAD z cytosolu do mitochondriów. 3.4. Allelowa segregacja potwierdziła transmisję autosomalną recesywną. Na poziomie komplementarnego DNA mutacja missense okazała się homozygotyczna, ale nie zidentyfikowano substytucji odpowiedzialnej za mutację nonsensowną. W związku z tym spekulujemy, że matrycowy RNA (mRNA) niosący mutację nonsensową jest degradowany przez maszynę rozpadu mRNA, w której pośredniczy nonsens. Przeprowadziliśmy badania drożdży, które wykazały, że mutacja missense wprowadzona w FLX1, homologie ludzkiego SLC25A32 w Saccharomyces cerevisiae, spowodowała poważny defekt wzrostu, który został uratowany przez egzogenną ekspresję FLX1 typu dzikiego, a także przez SLC25A32. Odkrycia te pokazują szkodliwy wpływ tej mutacji (ryc. S1A, S1B i S1C w dodatkowym dodatku, dostępne wraz z pełnym tekstem tego listu). Rysunek 1. Rycina 1. Histochemiczne obrazy próbek pobranych z mięśni szkieletowo-mięśniowych pobranych od pacjenta. Przekroje próbek pobranych z mięśni szkieletowo-pobranych z hematoksyliną i eozyną (panel A) pokazują niektóre poszarpane czerwone włókna obserwowane głównie w włóknach typu I (I), które w przeważającej mierze utleniają metabolizm, a nie w włóknach typu II (II), które przeważnie mają metabolizm glikolityczny. Barwienie ATPazą przy pH 9,4 (panel B) pokazuje włókna typu II (ciemne), które są nieco mniejsze niż włókna typu I (przezroczyste). Obserwowano przechowywanie lipidów, szczególnie w włóknach typu I (panel C). Reakcje enzymów utleniających wykazały występowanie poszarpanych czerwonych włókien w niektórych włóknach mięśniowych z wybarwianiem NADH-reduktazy tetrazolowej (Panel D) oraz z barwieniem oksydazy cytochromowej c (Panel E). W przeciwieństwie do tego, znaczna większość włókien (Panel F) zabarwiła się słabo na dehydrogenazę bursztynianową (zależny od dinukleotydu mitochondrialny kompleks II łańcucha oddechowego z adeniną), a niektóre nie wykazywały wcale plam. Postawiliśmy hipotezę, że upośledzony mitochondrialny transport FAD u naszego pacjenta wpłynął na aktywność mitochondrialnych flawoprotein zaangażowanych w utlenianie kwasów tłuszczowych, na co wskazuje profil biochemiczny wielokrotnego niedoboru odwodornienia acylo-koenzymu A i upośledzonego utleniania kwasów tłusz czowych w limfocytach (nie pokazano). Postawiliśmy także hipotezę, że upośledzony transport mitochondrialnego FAD wpływał na aktywność mitochondrialnych flawoprotein łańcucha oddechowego. 3,5 Nasza hipoteza była wspierana przez słabe barwienie dehydrogenazą bursztynianową obserwowane w próbce biopsji szkieletowo-mięśniowej pobranej od pacjenta (Figura 1) i przez niewielki wpływ haploinsufficiency SLC25A32 na zależne od FAD enzymy mitochondrialne obserwowane w fibroblastach pacjenta (ryc. S1D w dodatkowym dodatku). Podsumowując, u naszego pacjenta z Haploinsufficiency SLC25A32, niedobór w transporcie mitochondrialnym FAD spowodował późną nietolerancję wysiłku fizycznego związaną z nieprawidłowościami w profilu acylokarnityny. Objawy pacjenta okazały się wysoce wrażliwe na doustną suplementację ryboflawiną. Nasze odkrycia podkreślają znaczenie studiowania genów zaangażowanych w metabolizm ryboflawiny u takich pacjentów i poszerzają wiedzę na temat spektrum wrodzonych błędów transportu ryboflawiny. Manuel Schiff, MD, Ph.D. Szpital Uniwersytecki Robert-Debré, Paryż, Francja Alice Veauville- [hasła pokrewne: leczenie endometriozy, ginekolog, leczenie niepłodności Warszawa ]

[patrz też: ardell demi wispies allegro, niedoczynność tarczycy objawy psychiczne, endometrioza forum ]